一、样品前处理

1、所用试剂

1.1 水：去离子水

1.2 Loading Buffer：锂盐系统，pH 2.2

1.3 41种氨基酸标准品

2、前处理设备

1）分析天平:精度为 0.0001g

2）移液枪及枪头

3）一次性注射器及0.22μm滤膜

4）低范围pH试纸

3、样品制备

称取适量样品，加水(1.1)或Loading Buffer(1.2)溶解定容至容量瓶。测定并调至其pH值于2.2后，用一次性注射器取适量体积的试液，并过0.22μm的滤膜。移液枪移取1mL试液转移至进样瓶，上机待测。

针对其同一样品的试样溶液与杂质的浓度差别，可进行多倍数稀释液或大体积进样量、原液等情况，进行多次测试，得出准确的杂质占比含量。

二、分析方法描述（Biochrom 30+）

氨基酸分析仪分析方法参数：

1）色谱柱：Biochrom Li型阳离子交换树脂柱，4.6x20cm

2）分离程序：

运行时间：经分析时间+再生时间 174 min

3）反应单元温度：135°C

4）检测波长：570nm、440nm同时检测

三、样品中氨基酸含量的计算

样品测定液氨基酸的含量按式（1）计算:

Ci = Cs/As × Ai× F ··························（1）式中:

Ci ———样品测定液氨基酸i的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL);

Cs ———氨基酸标准工作液氨基酸s的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL);

Ai ———试样测定液氨基酸i的峰面积;

As ———氨基酸标准工作液氨基酸s的峰面积;

F ———样品稀释倍数。

附、氨基酸纯品中所含的各非目标氨基酸杂质含量其分析图谱及做样结果：

图1.  样品01原液